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1、菌種分離和培養(yǎng)菌種分離可用PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200g去皮后煮水1000ml,加入瓊脂20g、葡萄糖20g),高壓滅菌后倒入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)一薄層,采新鮮靈芝用75%乙醇進行表面消毒,切取菌蓋與菌柄之間一小塊組織,接種于培養(yǎng)基上;也可在無菌條件下采孢子,播種于培養(yǎng)基上,在25-28℃下培養(yǎng)3-4天,菌絲發(fā)出后轉(zhuǎn)管即為母種。母種在PDA培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)接擴大培養(yǎng)成原種,即可用來接二級菌種。
2、栽培方法:人工栽培可采用瓶(袋)栽或段木栽培。
(1)瓶栽和袋栽:以瓶栽較普遍,也可用塑料袋栽。二級菌種培養(yǎng)基成分為闊葉樹鋸木屑70%,麩皮28%,蔗糖2%,調(diào)至含水量200%,裝瓶或袋。高壓滅菌后[壓力147.1kPa(1.5kg/c㎡),2h],接入原種,溫度控制在28℃左右,15-20天菌絲即可長好,即為二級菌種。栽培種培養(yǎng)基配方及溫度等條件與培養(yǎng)二級種相同,也可用棉子皮75%,麩皮25%,加水后滅菌,接入二級菌種,在室內(nèi)暗光下培養(yǎng),約25天菌絲便可長滿瓶或袋。打開瓶蓋溫度仍控制在26-28℃,相對濕度85%-95%,散射光、通氣良好的條件下,45-60天便可完成現(xiàn)蕾、子實體成熟、散撒孢子等過程。
(2)段木栽培:在100ml水中加蔗糖2g,麥麩5g配制成營養(yǎng)液,選硬質(zhì)樹枝截成2cm長小節(jié),放入液中煮30min,取出后將樹枝4份與麥麩和木屑1份混合,裝瓶滅菌后接入原種,菌絲長滿后即可接段木。選直徑8-15cm的榆、楊、樺、櫟、桉、洋槐等樹種,秋冬落葉后砍伐,截成段架曬,次年5月下旬接種,在段木含水量40%-45%時,在其上打孔,放入少量木屑菌種后打入菌枝,如用純木屑菌種,加蓋后用蠟封孔。接種后碼成“井”字形,高1m,用塑料薄膜覆蓋,保持25-28℃下發(fā)菌,并常翻堆使發(fā)菌均勻,20-30天發(fā)菌結(jié)束,將段木橫臥地面,用濕砂土覆蓋,保持濕度,塑料薄膜覆蓋,并搭設(shè)蔭棚,常澆水保濕,越冬加厚蓋木,翌年清明前后取出染菌棒,截成15-20cm長節(jié),垂直埋入砂質(zhì)酸性壤土中,深度為段木全長的2/3-3/4,露出地面3-4cm,加強遮蔭、噴水等措施,保持芝場空氣相對濕度90%左右,2個月后即可采收。
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